В рамках работы по русификации обзорного каталога исследований по мышечной дистрофии, проводимых по всему миру, на сайте МойМио в разделе Каталог исследований по МДД опубликована статья посвященная исследованию способности окта-гуанидин морфолино восстанавливать экспрессию дистрофина.
Терапия антисмысловыми олигонуклеатидами (AO) недавно разработана и имеет большой потенциал для лечения заболеваний начиная от вирусных инфекций до раковых образований. Успешное применение терапии позволило расширить область ее применения, и данный метод применили для лечения миодистрофии Дюшена. Этот метод использует определенную последовательность для AON предназначенную для пропуска экзона, для того чтобы исправить рамку считывания видоизмененной мРНК дистрофина, и представляет беспрецедентную перспективу генной терапии по двум главным причинам. Во-первых, ген состоит из 79 экзонов- 2.3 миллиона пар оснований. Форма мышечного дистрофина содержит 3 685 аминокислот (427 kd) и может быть разделена на четыре структурных области: NH3 — окончание, стержень, область богатую цистеином, и СООН- окончание. Что более важно, стержень, кажется, не важен для функций дистрофина. Например, удаление экзонов от 17 до 49 было связано с только умеренным клиническим фенотипом. Точно так же, искусственно построенный микродистрофин с удалением экзонов 18 — 58 остается в значительной степени функциональным. Во-вторых, значительная доля мутаций происходят в этой некритической области гена. Таким образом функции белка могут быть сохранены несмотря на пропуск видоизмененного экзона или экзонов, необходимых для восстановления открытой рамки считывания. Считается, что терапия AON была бы в состоянии исправить почти все типы мутаций в стержне, преобразовывая > 60% МДД к почти нормальным фенотипам или более умеренному фенотипу МДБ. Ободрительно, что дистрофин- положительные волокна найдены во многих мышцах при МДД у людей и у моделей животных. Эти так называемые реверантные волокна, кажется, продукт спонтанно измененного сплайсинга, при котором происходит пропуск видоизмененного экзона или экзонов, которые разрушают рамку считывания эндогенного гена, присутствие этих реверантных волокон может обеспечить толерантность к дистрофину, синтезированному при лечении AON.
Потенциал AO-установленного пропуска экзона для лечения МДД, был первоначально продемонстрирован в системах клеточных культур и у mdx мышей. Позже, восстановление экспрессии дистрофина такой терапией было продемонстрировано у пациентов с МДД при внутримышечных инъекциях 2’O метилфосфоротиоата (2OMePS) в Нидерландах. Однако, пропуск экзона и экспрессия дистрофина являются очень переменными, и терапевтическое количество дистрофина было достигнуто только в некоторых скелетных мышцах посредством системной поставки. Кроме того, эффективная экспрессия дистрофина не была достигнута в сердечной мышце. Это могло уменьшить лечебное действие терапии антисмысловыми олигонуклеатидами при МДД, поскольку болезнь затрагивает все мышцы тела, и смерть обычно наступает вследствие отказа дыхательных и сердечных мышц.
Один подход для улучшения эффективности пропуска экзона должен увеличить эффективность поставки препарата, путем применения пептидов улучшаюших доставку препарата в клетку. 1 Последний раз, мы и другие группы показали высокие уровни экспрессии дистрофина и в скелетных и в сердечных мышцах при применении олигонуклеатидов, меченных специально предназначенным богатым аргинином пептидом. Однако, длительные повторные применения пептидов, требуемых для того, чтобы доставлять АОN, повышают риск иммунной реакции. Гуанидиновая головка богатых аргинином пептидов ответственна за эффективную поставку морфолиновых олигонуклеатидов, и группа из 8-10 гуанидиновых головок показывают самый выраженный эффект усиления поставки. Здесь, мы сообщаем об использовании непептидного дендримерного октагуанидина с морфолиновым олигомером, созданным для мышей для пропуска экзона 23 (E23) ) [Vivo-MorpholinoE23 (Vivo-ME23)].. Мы продемонстрировали, что поставка значительно улучшила эффективность ME23-вызванного пропуска E23 у mdx мышей, модели МДД. Внутривенное введение (IV) 6 мг/кг — VivoME23 привело к достижению функциональных уровней дистрофина в скелетных мышцах, эквивалентных достигнутому при использовании 300 мг/кг неизмененного ME23. Повторные инъекции Vivo-ME23, восстановление экспрессии дистрофина во всех скелетных мышцах и частичной экспрессии в сердечной мышце, не привели к иммунным реакциям. Это вместе со снижением патологии мышц указывает на возможность использования Vivo-MorpholinoE23, как терапия для большинства пациентов с МДД. Эффективная экспрессия дистрофина была также продемонстрирована в гладких мышцах кровеносных сосудов всего тела.
Полный текст статьи
Каталог исследований по МДД
